一、研究背景
枳壳(Fructus Aurantii,FA)作为药食两用的功能性食品,在促进消化方面功效显著。然而,生枳壳(RFA)对部分患者存在副作用,因此临床多使用炮制后的枳壳(PFA)。目前,FA的生产和质量评价主要依赖传统方法,这种方式主观性强,导致产品质量稳定性差。建立客观、全面的PFA质量评价体系迫在眉睫。
FA的风味是其品质的关键指标之一,直接影响产品的应用和消费者接受度。其风味变化与挥发性成分密切相关,而电子鼻作为一种模拟人类嗅觉系统的智能检测设备,能够快速、低成本地获取气味信息,在食品和医药生产的过程监控与质量控制领域应用广泛。在FA的研究中,电子鼻可用于分析其挥发性成分变化,为品质评价提供重要依据。同时,结合相对气味活性值(ROAV)等分析方法,能更全面、客观地反映FA加工后挥发性风味化合物的变化特征,对快速质量评价意义重大。
二、实验方法
(一)样品准备
实验所用的RFA和PFA均采购自广州子孙医药健康有限公司,并经广州中医药大学张丹燕教授鉴定。RFA在7月采摘,经干燥、切片等处理;PFA则是在RFA基础上,经过发酵、清洗、蒸制等一系列加工工序制成。
(二)上海保圣电子鼻cNose检测
采用上海保圣实业发展有限公司生产的电子鼻对RFA和PFA进行检测。该电子鼻配备18种不同的金属氧化物半导体(MOS)传感器,可检测多种挥发性物质。实验时,精确称取4.0g样品,放入20mL顶空玻璃富集瓶中,密封后在26℃环境下静置30min。设置电子鼻的清洁时间为120s,载气流量为400mL/min,在60s内记录18个传感器的响应值,以生成响应曲线。选取各成分的最大响应值进行数据分析,从整体上评估样品的挥发性特征。
(三)数据处理
运用GraphPad Prism 8软件进行数据统计分析,通过单因素方差分析(ANOVA)比较不同组数据的差异,确定实验结果的显著性。利用Origin 2021软件对电子鼻数据进行主成分分析(PCA),直观呈现不同样品间的差异和相似性,以探索数据的潜在结构。借助SIMCA 14.1软件进行正交偏最小二乘法判别分析(OPLS - DA),进一步挖掘数据中的关键信息,寻找区分RFA和PFA的关键标记物,并评估模型的拟合优度和预测能力。
三、实验结果
(一)电子鼻区分效果
通过层次聚类分析(HCA)对电子鼻的最大响应值进行分析,结果显示所有样品可分为两大类,表明RFA和PFA在气味特征上存在明显差异。主成分分析(PCA)的得分图中,PC1和PC2分别解释了64.4%和26.1%的方差,尽管样品点存在部分重叠,但仍能观察到不同品种间的分离趋势。
进一步的正交偏最小二乘法判别分析(OPLS - DA)得分图清晰地展示了两组样品的差异,独立变量拟合指数(\(R^{2}X\))为0.947,因变量拟合指数(\(R^{2}Y\))为0.965,预测效率(\(Q^{2}\))达到0.944,验证参数\(R^{2}\)和\(Q^{2}\)均超过0.5,表明模型拟合良好。RFA和PFA分别均匀分布在水平轴的负半轴和正半轴,说明不同样品的重复性良好,且二者在香气上存在显著差异。
(二)关键传感器确定
结合雷达图分析发现,电子鼻可通过sensor4、sensor5、sensor14、sensor17和sensor18区分PFA样品;sensor3、sensor6、sensor14和sensor16对样品的香气化合物响应较强。这意味着PFA中可能含有更高丰度的硫化物、含氮物质、醛酮类、醇类和甲烷等挥发性化合物,充分展示了电子鼻在检测FA加工过程中挥发性化合物变化方面的敏感性和有效性。
(三)与其他分析方法的关联
通过对电子鼻数据与GC - MS分析结果进行相关性分析,发现萜品烯 - 4 - 醇、6 - 表 - 松油醇、芳樟醇、桧烯、α - 甲基和α - 松油醇与上述传感器的响应值呈负相关;而D - 柠檬烯、α - 蒎烯、γ - 萜品烯和环己烷甲醇的丰度与sensor3、sensor4、sensor5、sensor6、sensor14、sensor16、sensor17和sensor18的信号强度呈强正相关。这表明电子鼻能够对FA中特定的挥发性化合物做出响应,与GC - MS分析结果相互印证,进一步验证了电子鼻数据的可靠性,也体现了其在判断FA产品风味方面的重要作用。
在枳壳品质评价研究中,电子鼻发挥了至关重要的作用。它能够有效区分RFA和PFA的香气特征,确定关键传感器,并且与其他分析方法相互关联,为全面了解枳壳在加工过程中的风味变化提供了有力支持,对建立科学的枳壳质量评价体系具有重要意义。
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